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當前位置:首頁技術文章心肌細胞 細胞株 培養

心肌細胞 細胞株 培養

更新時間:2018-05-10點擊次數:1314

 

(心肌細胞)細胞株,通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物,是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。

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心肌細胞 【培養指南】

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 

心肌細胞 【細胞凍存】

待細胞生長狀態良好時,可進行293/HEK-293細胞|細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

 

心肌細胞 【復蘇的原則】

快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使心肌細胞|細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。

心肌細胞 拜力|復旦細胞庫全國各地均可發貨,全國統一價格,本公司出售的所有細胞僅供科研使用。

 

心肌細胞 【注意事項】

拜力生物實驗室專業人士提醒廣大科研實驗者,購買心肌細胞培養,注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

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